在使用時(shí)，我們需要先把目鏡測(cè)微尺裝入目鏡筒中，具體操作為：先把目鏡從顯微鏡上拔下來，在遠(yuǎn)離鏡片（也就是我們平時(shí)觀察時(shí)看的地方）的一端有個(gè)齒輪狀的圓形結(jié)構(gòu)，把它擰開，然后把目鏡測(cè)微尺裝入其中，注意正面要放于視場(chǎng)光闌上，然后將其擰回去，放回目鏡就行了。有的的顯微鏡由于結(jié)構(gòu)精密，不允許拆卸，需專門配有測(cè)微尺的目鏡。然后將測(cè)微臺(tái)尺放于載物臺(tái)上，調(diào)節(jié)顯微鏡焦距知道能看到臺(tái)尺清晰的刻度為止。這時(shí)調(diào)整讓兩尺子的一端在整刻度重合，然后尋找另一端在什么地方重合，數(shù)出他們重疊部分的格數(shù)就能算出目鏡測(cè)微尺在放大情況下的實(shí)際倍率了。

        具體計(jì)算公式如下：

目鏡測(cè)微尺每格=（臺(tái)尺重疊數(shù)X10）÷目尺重疊格數(shù)。如上圖臺(tái)尺的重疊格數(shù)為4格，目鏡測(cè)微尺的重疊格數(shù)為10格。由此可以計(jì)算出目鏡測(cè)微尺每格代表的長(zhǎng)度為：（4X10）/10=4um。

        確定好目鏡測(cè)微尺每格代表的長(zhǎng)度后移開臺(tái)尺，之后使用時(shí)就能用它確定被檢物實(shí)際長(zhǎng)度了。由于生物顯微鏡有多個(gè)物鏡，每個(gè)物鏡放大倍率不同，目鏡測(cè)微尺在不同倍率下所代表的實(shí)際長(zhǎng)度不同，因此在切換倍率時(shí)應(yīng)重新校準(zhǔn)。